食品中防腐剂（山犁酸、苯甲酸）分析专用气相色谱仪

一、适用范围

适用于测定酱油、果子汁等食品的苯甲酸钠、山梨酸及山梨酸钾的含量。

通过酸化处理从样品中提取苯甲酸钠、山梨酸及山梨酸钾，气相色谱法测定，绘制标准曲线，计算样品含量。

二、实训目的、要求

①理解气相色谱法的原理，能熟练操作气相色谱仪。

②能熟练处理样品。

三、实训原理

样品酸化后，用乙醚提取山梨酸，用氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，与标准系列比较定量。

四、仪器和用具

气相色谱仪：GC-7800型色谱仪，配有氢火焰离子化检测器。（北京普瑞分析仪器有限公司生产）

五、试剂

①乙醚：不含过氧化物。

②石油醚：沸程30~600 ℃

③盐酸。

④无水硫酸钠。

⑤盐酸（1+1）：取100 mL盐酸，加水稀释至200 mL。

⑥氯化钠酸性溶液(40 g/L)：向氯化钠溶液(40 g/L)中加少量盐酸（1+1）酸化。

⑦山梨酸标准溶液：准确称取山梨酸（0.1g左右）g，置于100 mL容量瓶中，用石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂溶解后并稀释至刻度。此溶液相当于（1m g/mL左右）山梨酸。

⑧山梨酸标准使用液：吸取适量的山梨酸标准溶液，以石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂稀释至每毫升相当于0.5150 mg、0.2575mg、0.1288 mg、0.06438 mg、0.03219 mg山梨酸。

⑨苯甲酸钠标准溶液：准确称取苯甲酸钠（0.1g左右）g，置于100 mL容量瓶中，用石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂溶解后并稀释至刻度。此溶液相当于（1m g/mL左右）苯甲酸钠。

⑩苯甲酸钠标准使用液：吸取适量的苯甲酸钠标准溶液，以石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂稀释至每毫升相当于0.5245 mg、0.2623mg、0.1311 mg、0.06556mg、0.0375 0mg苯甲酸钠。

六、操作步骤

1.样品提取（可口可乐、“6个柠檬”）

称取（10g左右）可口可乐和（10g左右）6个柠檬事先混合均匀的样品，分别置于50mL带塞锥形瓶中，加0.5mL盐酸（1+1）酸化，用15mL、10mL乙醚提取2次，每次振摇1min，将上层乙醚提取液吸入另一个25mL带塞锥形瓶中。合并乙醚提取液，用3mL氯化钠酸性溶液（40g/L）洗涤2次，静止15min，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入25mL容量瓶中。加乙醚至刻度，混匀。准确吸取10mL至带塞锥形瓶中，置40℃水浴上挥干，加入2mL石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂溶解残渣，备用。

2.色谱参考条件

①色谱柱：毛细管柱（苯甲酸、山犁酸分析专用柱）

②气流速度：载气为氮气，压力分流比30:1，

空气流速400mL/min，

H2流速30mL/min，尾吹25mL/min。

③温度：进样口230℃；检测器230℃；柱温190℃。

3.测定

进样2 μL标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中，可测得不同浓度山梨酸、苯甲酸钠的峰高，以浓度为横坐标、相应的峰高值为纵坐标绘制标准曲线。同时进样2 μL样品溶液。测得峰高与标准曲线比较定量。

七、测定结果

                             山梨酸、苯甲酸-200ug/mL

                                     山梨酸、苯甲酸-100ug/mL

                         山梨酸、苯甲酸-250ug/mL

八、说明及注意事项

①样品处理时酸化，可使山梨酸钾/苯甲酸钠钠转变为山梨酸/苯甲酸钠。

②乙醚提取液应用无水硫酸钠充分脱水，进样溶液中含水会影响测得结果。

③本法可与测定苯甲酸钠钠或苯甲酸钠结合一起测定。